如何根據(jù)一個單位點的突變體,研究一個基因的功能?
已經(jīng)得到了突變體,如何繼續(xù)研究這個基因的功能
1个回答
匿名用户2023-02-05 10:04
以下從植物領(lǐng)域來講:
常規(guī)情況下,獲得突變體后當定位克隆控制該性狀的基因。找到突變位點后進行一些基本的分子實驗和生信分析:
1)構(gòu)建promoter+gDNA的互補載體,轉(zhuǎn)化突變體,觀察是否互補表型
2)構(gòu)建Actin/Ubiquitin/35S+CDS+標簽的載體,轉(zhuǎn)化突變體,觀察目的基因過表達的表型,同時標簽蛋白可用于下游分子實驗
3)構(gòu)建CRISPR/Cas9敲除載體,觀察在目的基因敲除下產(chǎn)生的表型
4)明確基因組織表達模式,亞細胞定位情況
5)paralog和ortholog是否有過研究,突變位點保守性如何
6)目的基因編碼何種蛋白,有什么功能,突變位點位于哪個結(jié)構(gòu)域,可能對蛋白功能造成哪些影響
常規(guī)情況下,獲得突變體后當定位克隆控制該性狀的基因。找到突變位點后進行一些基本的分子實驗和生信分析:
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