各位看看我的引物酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基有什么問題嗎

2022-08-29 00:20

5’-CCTGAATTCATGGCTAGCCTTCTCA-3’5’-CCGCTCGAGTATTTA ATTGAATAGTT-3’
2個(gè)回答
還可以,但是要注意退火溫度,還有3‘端盡量避免a t
你加的是EcoRI和XhoI位點(diǎn)把?酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基都沒問題,不過要指出一點(diǎn),避免3'端出現(xiàn)A或T,最好是C或G,是A或T的話擴(kuò)增效率比較低。
相關(guān)問答
我想問問我加的酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基對(duì)不對(duì)
2個(gè)回答2022-09-05 08:06
這種情況一般和酶切位點(diǎn)關(guān)系不大。你應(yīng)該首先確定在不加酶切位點(diǎn)的情況下,是否能做出PCR。加上酶切位點(diǎn)對(duì)PCR的條件影響并不大。如果在沒有酶切位點(diǎn)的情況下,還做不出,那說明你要么是底物濃度太低,或者引物...
全文
為什么pcr 引物設(shè)計(jì)出來,下游引物加上酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基后,有一個(gè)Tm值是負(fù)值呀?
1個(gè)回答2022-09-03 15:43
基本上設(shè)計(jì)引物的時(shí)候用primer5看看就差不多了,沒有非特異沒有自身二級(jí)結(jié)構(gòu),然后TM計(jì)算就是AT加2GC加4,加在一起就是TM退火溫度……不要有連續(xù)5個(gè)以上一樣的堿基,堿基分布均勻一些……就差不多...
全文
引物添加了酶切位點(diǎn)的,做的時(shí)候突然想到一個(gè)問題,進(jìn)行pcr擴(kuò)增之后5端突出的A算一個(gè)保護(hù)堿基嗎?
1個(gè)回答2022-11-11 10:26
限制酶切位點(diǎn)的保護(hù)堿基,一般首先要考慮限制酶的特異性,決定添加數(shù)目和序列,同時(shí)還要考慮兩條引物的Tm值和各引物的堿基分布及GC含量,以優(yōu)化PCR和后續(xù)酶切。是具有一定特異性和功能性的。taq在加A是沒...
全文
請(qǐng)教各位我設(shè)計(jì)引物加了酶切位點(diǎn)和六個(gè)保護(hù)堿基,結(jié)果擴(kuò)出來的片段短了,缺少我之前設(shè)計(jì)引物那段互補(bǔ)片段
2個(gè)回答2022-07-04 04:40
你看看新加進(jìn)去的酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基是不是能和你的基因片段匹配,如果匹配程度高的話,或者引物內(nèi)部產(chǎn)生頸環(huán)結(jié)構(gòu)的話,可能會(huì)造成擴(kuò)增產(chǎn)物的異常。
我會(huì)保護(hù)你一切
4個(gè)回答2022-06-11 02:21
你想問什么?
如何引導(dǎo)孩子學(xué)會(huì)保護(hù)自己?
1個(gè)回答2024-01-29 16:18
幫助孩子學(xué)會(huì)保護(hù)自己是家長(zhǎng)應(yīng)該關(guān)注和重視的問題,以下是一些方法: 1. 培養(yǎng)孩子的自我保護(hù)意識(shí):家長(zhǎng)應(yīng)該讓孩子明耐悉遲白保護(hù)自己的重要性,告訴他們遇到危險(xiǎn)時(shí)應(yīng)該怎么做。例如,學(xué)會(huì)說“不”,學(xué)會(huì)向身邊...
全文
基因突變的堿基替換必須是一對(duì)堿基同事替換,不能是一個(gè)堿基替換?
1個(gè)回答2023-09-25 04:11
單個(gè)替換可以,但不是A=C。比如燃如在復(fù)制或轉(zhuǎn)錄的時(shí)候,一條鏈?zhǔn)贤羯系腁可以替換成C,另一條單鏈正常。那么突變后轉(zhuǎn)錄來的RNA相應(yīng)的U變成G,殲橡仔復(fù)制來的DNA單鏈T變成G。
限制性內(nèi)切酶的工作原理
1個(gè)回答2024-02-29 06:33
一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子
基因是什么?與堿基有何關(guān)系?與堿基對(duì)又有何關(guān)系?
1個(gè)回答2022-09-12 15:46
遺傳信息的基本單位。一般指位于染色體上編碼一個(gè)特定功能產(chǎn)物(如蛋白質(zhì)或RNA分子等)的一段核苷酸序列。 堿基共有5種:胞嘧啶(縮寫作C)、鳥嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T,DNA專有)和尿嘧啶...
全文
人有多少個(gè)基因?有多少個(gè)堿基對(duì)?
1個(gè)回答2023-01-02 17:00
大約20000到25000個(gè)基因。 人類基因組,又稱人類基因體,是指人的基因組,由23對(duì)染色體組成,其中包括22對(duì)體染色體、1條X染色體和1條Y染色體。人類基因組含有約30億個(gè)DNA堿基對(duì),其中一部分...
全文
熱門問答