各位看看我的引物酶切位點和保護堿基有什么問題嗎

2022-08-29 00:20

5’-CCTGAATTCATGGCTAGCCTTCTCA-3’5’-CCGCTCGAGTATTTA ATTGAATAGTT-3’
2個回答
還可以,但是要注意退火溫度,還有3‘端盡量避免a t
你加的是EcoRI和XhoI位點把?酶切位點和保護堿基都沒問題,不過要指出一點,避免3'端出現(xiàn)A或T,最好是C或G,是A或T的話擴增效率比較低。
相關問答
我想問問我加的酶切位點和保護堿基對不對
2個回答2022-09-05 08:06
這種情況一般和酶切位點關系不大。你應該首先確定在不加酶切位點的情況下,是否能做出PCR。加上酶切位點對PCR的條件影響并不大。如果在沒有酶切位點的情況下,還做不出,那說明你要么是底物濃度太低,或者引物...
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為什么pcr 引物設計出來,下游引物加上酶切位點和保護堿基后,有一個Tm值是負值呀?
1個回答2022-09-03 15:43
基本上設計引物的時候用primer5看看就差不多了,沒有非特異沒有自身二級結構,然后TM計算就是AT加2GC加4,加在一起就是TM退火溫度……不要有連續(xù)5個以上一樣的堿基,堿基分布均勻一些……就差不多...
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引物添加了酶切位點的,做的時候突然想到一個問題,進行pcr擴增之后5端突出的A算一個保護堿基嗎?
1個回答2022-11-11 10:26
限制酶切位點的保護堿基,一般首先要考慮限制酶的特異性,決定添加數(shù)目和序列,同時還要考慮兩條引物的Tm值和各引物的堿基分布及GC含量,以優(yōu)化PCR和后續(xù)酶切。是具有一定特異性和功能性的。taq在加A是沒...
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請教各位我設計引物加了酶切位點和六個保護堿基,結果擴出來的片段短了,缺少我之前設計引物那段互補片段
2個回答2022-07-04 04:40
你看看新加進去的酶切位點和保護堿基是不是能和你的基因片段匹配,如果匹配程度高的話,或者引物內(nèi)部產(chǎn)生頸環(huán)結構的話,可能會造成擴增產(chǎn)物的異常。
我會保護你一切
4個回答2022-06-11 02:21
你想問什么?
如何引導孩子學會保護自己?
1個回答2024-01-29 16:18
幫助孩子學會保護自己是家長應該關注和重視的問題,以下是一些方法: 1. 培養(yǎng)孩子的自我保護意識:家長應該讓孩子明耐悉遲白保護自己的重要性,告訴他們遇到危險時應該怎么做。例如,學會說“不”,學會向身邊...
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基因突變的堿基替換必須是一對堿基同事替換,不能是一個堿基替換?
1個回答2023-09-25 04:11
單個替換可以,但不是A=C。比如燃如在復制或轉(zhuǎn)錄的時候,一條鏈氏汪上的A可以替換成C,另一條單鏈正常。那么突變后轉(zhuǎn)錄來的RNA相應的U變成G,殲橡仔復制來的DNA單鏈T變成G。
限制性內(nèi)切酶的工作原理
1個回答2024-02-29 06:33
一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并能在特定的切點上切割DNA分子
基因是什么?與堿基有何關系?與堿基對又有何關系?
1個回答2022-09-12 15:46
遺傳信息的基本單位。一般指位于染色體上編碼一個特定功能產(chǎn)物(如蛋白質(zhì)或RNA分子等)的一段核苷酸序列。 堿基共有5種:胞嘧啶(縮寫作C)、鳥嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T,DNA專有)和尿嘧啶...
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人有多少個基因?有多少個堿基對?
1個回答2023-01-02 17:00
大約20000到25000個基因。 人類基因組,又稱人類基因體,是指人的基因組,由23對染色體組成,其中包括22對體染色體、1條X染色體和1條Y染色體。人類基因組含有約30億個DNA堿基對,其中一部分...
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