質(zhì)粒載體如何構(gòu)建

2022-09-07 05:22

3個(gè)回答
PCR 酶切 連接 轉(zhuǎn)化 涂板 搖菌 提質(zhì)粒。。。。
首先需要一個(gè)表達(dá)載體,看你需要原核還是真核,看情況選擇,然后有獲得你需要的目的基因,在兩端加酶切位點(diǎn),將目的基因與載體連接到一起后就完成了質(zhì)粒載體的構(gòu)建了。
你的質(zhì)粒載如果是克隆型的,那么必須有:復(fù)制起始和終止位點(diǎn)、多克隆位點(diǎn)、標(biāo)記位點(diǎn)、分子量小、易分離等特點(diǎn)。如果是表達(dá)型的則必須有:轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),也就是要有啟動(dòng)子和終止子等。
相關(guān)問答
質(zhì)粒的構(gòu)建策略是什么?
1個(gè)回答2022-08-02 04:23
天然存在的野生型質(zhì)粒由于分子量大、拷貝數(shù)低、單一酶切位點(diǎn)少、遺傳標(biāo)記不理想等缺陷,不能滿足克隆載體的要求,因此往往需要以多種野生型質(zhì)粒為基礎(chǔ)進(jìn)行人工構(gòu)建。目前實(shí)驗(yàn)室使用的大腸桿菌質(zhì)粒大多是由少數(shù)幾個(gè)野...
全文
質(zhì)粒構(gòu)建的方法
1個(gè)回答2022-08-02 05:04
不同類型的質(zhì)粒有不同的構(gòu)建方案。 測(cè)序的話,將目的片段克隆到引物序列下游就好; 而表達(dá)質(zhì)粒還要求有正確的閱讀框架
質(zhì)粒載體的種類有哪些???
1個(gè)回答2023-01-03 12:31
看看生物通吧
載體和質(zhì)粒的區(qū)別? 載體與質(zhì)粒的概念有什么不同?
1個(gè)回答2022-07-30 23:33
質(zhì)粒是指細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的小型環(huán)狀DNA分子,主要控制細(xì)菌的次級(jí)代謝 載體是指在基因工程中用以協(xié)載目的基因的小型環(huán)狀DNA分子,載體一般是經(jīng)過改造的質(zhì)粒,還可以是動(dòng)植物病毒的DNA
構(gòu)成物質(zhì)的基本粒子有____、_____.
1個(gè)回答2022-09-24 01:30
原子,分子 和離子.
質(zhì)粒載體和重組質(zhì)粒的區(qū)別
2個(gè)回答2023-02-22 03:20
我們所說的質(zhì)粒是指細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的小型環(huán)狀DNA分子,其作用是控制細(xì)菌的次級(jí)代謝 ,而載體是指在基因工程中用以協(xié)載目的基因的小型環(huán)狀DNA分子,載體一般是經(jīng)過改造的質(zhì)粒,還可以是動(dòng)植物病毒的DNA,豐暉...
全文
載體和質(zhì)粒的區(qū)別?
3個(gè)回答2022-06-28 07:59
質(zhì)粒是指細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的小型環(huán)狀DNA分子,主要控制細(xì)菌的次級(jí)代謝 載體是指在基因工程中用以協(xié)載目的基因的小型環(huán)狀DNA分子,載體一般是經(jīng)過改造的質(zhì)粒,還可以是動(dòng)植物病毒的DNA
T載體是質(zhì)粒載體嗎
1個(gè)回答2022-10-24 06:29
PCR產(chǎn)物一般和 T載體相連,T載體是一種線性載體,和你的目的片段連接以后,就變成了 圓形的質(zhì)粒。 T載體的種類很多,takara的書上有很多介紹。
質(zhì)粒構(gòu)建、提取詳細(xì)步驟?
1個(gè)回答2022-08-13 05:16
構(gòu)建載體就是把目標(biāo)DNA、載體、DNA連接酶、酶的buffer放到一起,然后4度連接過夜就行了。上面各個(gè)東西的用量,你可以參考連接酶的說明書。如果你是想連T載體的話,就可以直接拿PCR產(chǎn)物和載體連,如...
全文
構(gòu)建好的質(zhì)粒菌液pcr驗(yàn)證是正確的,但是就是怎么也提取不出質(zhì)粒
1個(gè)回答2023-01-18 18:55
同樣的問題,我也正經(jīng)歷著,別著急慢慢分析原因. 如果你做得是質(zhì)粒的構(gòu)建,我想根本的原因是沒有連接上,那得重新做,考慮連接的問題. 對(duì)于你的那個(gè)5天得菌液,原則上說菌液放久了,質(zhì)粒可能會(huì)丟失,你可以重新...
全文
熱門問答