外源基因連接T載體導入到大腸桿菌,那么外源基因能在大腸桿菌中表達嗎?

2022-09-12 01:49

3個回答
可以的,因為它上面有啟動子T7/SP6(哪個我忘記了)。
但是T載體一般不用做表達載體,因為它是靠T-A連接的(T載體上含多個T,PCR產物含多聚A),讀碼框未必正確,所以一般是用作中間過渡的載體,后續(xù)要把這段基因切下來(你的擴增引物上需要設計酶切位點,保證讀碼框正確),換到專門的表達載體去才行。
根據(jù)課本中基因工程的講述,外源基因在一定條件下能表達
主要看連接外源基因的啟動子是否可以在原核細胞中表達。T載體連接外源基因的前端是沒有啟動子的,在大腸桿菌中不表達,一般是作為基因克隆的中間載體使用。
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所以一般是用作中間過渡的載體,因為它是靠T-A連接的(T載體上含多個T,讀碼框未必正確。但是T載體一般不用做表達載體可以的,保證讀碼框正確),因為它上面有啟動子,PCR產物含多聚A),后續(xù)要把這段基因...
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