平末端DNA的連接方法?

2022-11-18 12:11

2個(gè)回答
用taq酶在72°反應(yīng)半個(gè)小時(shí),末端加A,然后用T載體進(jìn)行連接克隆
可以的。
dna連接酶分為兩類(lèi),一類(lèi)是e。coli
dna連接酶,只能連接黏性末端;一類(lèi)是t4
dna連接酶,既能連接黏性末端,又能連接平末端,但連接平末端之間的效率比較低。
相關(guān)問(wèn)答
平末端能用DNA連接酶連嗎
1個(gè)回答2022-12-19 05:08
可以的。 DNA連接酶分為兩類(lèi),一類(lèi)是E。coli DNA連接酶,只能連接黏性末端;一類(lèi)是T4 DNA連接酶,既能連接黏性末端,又能連接平末端,但連接平末端之間的效率比較低。
dna 翻譯為什么 5末端開(kāi)始3末端結(jié)束?為什么不是倒過(guò)來(lái)呢?
4個(gè)回答2022-06-21 11:41
核糖體的移動(dòng)方向. 翻譯起始識(shí)別結(jié)構(gòu):SD序列(原核)和5'帽子結(jié)構(gòu)(真核) 補(bǔ)充:像原核是邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯的,如果像你說(shuō)的翻譯是3-5的話,轉(zhuǎn)錄延伸復(fù)合物和核糖體qi不相碰,無(wú)法想象的啊!
連接平末端的連接酶叫什么?
2個(gè)回答2022-10-19 05:54
DNA連接酶 平末端也可以用DNA連接酶連接,不過(guò)效率很低,連接條件需要摸索,一般加入更大量的連接酶還可以加入PEG作為凝聚劑 常用的平末端DNA片段連接法,主要有同聚物加尾法、銜接物連接法及接頭連接...
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平末端連接是否有要求?
1個(gè)回答2022-12-18 20:42
平末端是不配對(duì)的 但大多數(shù)情況下平末端要經(jīng)過(guò)修飾,成為粘性末端,這樣就可以配對(duì)了,
不同平末端之間可以連接嗎
1個(gè)回答2022-12-15 13:13
肯定的告訴你,能! 不需要什么證據(jù),我做了6年分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)了,都是這么過(guò)來(lái)的。 平末端連接的優(yōu)勢(shì)在于,可以選擇的酶種類(lèi)多。兩個(gè)不同的酶分別切質(zhì)粒和目的片段,只要切出來(lái)都是平末端,就可以連接;而粘性末...
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如何提高DNA平端連接的效率
1個(gè)回答2022-08-20 14:06
當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線處切開(kāi)時(shí),切開(kāi)的DNA兩條單鏈的切口,是平整的,這樣的切口叫平末端。被限制性?xún)?nèi)切酶切斷的DNA分子片段,需要一種特殊的酶——DNA連接酶來(lái)縫合,恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸...
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關(guān)于平末端DNA加A的一些問(wèn)題~
1個(gè)回答2022-06-26 08:03
是一個(gè)人的問(wèn)題么。。。 你這個(gè)平末端DNA是怎么得到?如果是PCR得到的話就表示用的酶帶有外切酶活性,如果不回收一下的話再加A還是會(huì)被切掉的 如果是直接拿到的一個(gè)平末端DNA片段那就可以用第二種方法了...
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不同的平末端能連接起來(lái)嗎,
1個(gè)回答2022-12-20 03:10
平末端是不配對(duì)的 但大多數(shù)情況下平末端要經(jīng)過(guò)修飾,成為粘性末端,這樣就可以配對(duì)了,這才能連接起來(lái)!
PCR的產(chǎn)物3末端有A 而T載體的3末端有T. 都是3末端,怎么連接上呢?
2個(gè)回答2022-09-17 23:56
產(chǎn)物和載體都是兩條DNA鏈,產(chǎn)物帶A的鏈與載帶T的鏈互補(bǔ)配對(duì),產(chǎn)物帶A的鏈的互補(bǔ)鏈(即5‘端)與載體帶T的鏈連接的,你自己在紙上畫(huà)畫(huà)
急!平末端連接問(wèn)題
1個(gè)回答2022-06-30 09:47
你的外源片段末端有沒(méi)有磷酸化?
熱門(mén)問(wèn)答