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基因克隆載體怎么選擇

2022-12-07 06:01

1個(gè)回答

2022-12-07 10:31

選擇目的基因,并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物；用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；選擇合適（抗性標(biāo)記、酶切位點(diǎn)等）的克隆載體（為了保真擴(kuò)增）,并將PCR片段連接入克隆載體中；（一般用Taq酶的PCR產(chǎn)物在末尾會(huì)自帶一個(gè)A,可在Solution 1作用下與兩端各帶一個(gè)T的線性。

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克隆基因?yàn)槭裁匆恢边B不到載體上

2個(gè)回答2023-05-28 12:02

基因克隆上去沒有原因，克隆不上去就不好說清楚了。對(duì)于這種情況，直接交給專業(yè)的公司做就行了，也就千把塊錢，時(shí)間也就是1-2周。我們實(shí)驗(yàn)室是在禾船生物克隆的，非常便捷。

基因克隆載體連接步驟

1個(gè)回答2023-01-18 05:40

基因克隆的步驟： 1、獲取目的基因； 2、將目的基因與載體連接； 3、重組體載入受體細(xì)胞； 4、重組體的篩選、克隆。具體到載體連接這一步，將酶切后的載體與目的片段加入相應(yīng)的連接體系中就可以了。

原核表達(dá)目的基因?yàn)槭裁匆瓤寺〉娇寺≥d體上去

1個(gè)回答2023-02-22 10:20

如果不克隆如載體，基因本身是一段DNA，很難轉(zhuǎn)染到受體細(xì)胞中，即使轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，也不能篩選轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

怎樣克隆基因或是克隆基因的一般步驟是什么？

1個(gè)回答2022-09-09 10:50

一般情況下有兩種方法：一、反轉(zhuǎn)錄法：用已知的單鏈mRNA反轉(zhuǎn)錄出一條單鏈的DNA，再用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成雙鏈DNA。二、用已知的蛋白質(zhì)的多肽鏈推測(cè)出單鏈mRNA（一個(gè)氨基酸對(duì)應(yīng)相應(yīng)的密碼子）上堿基的...

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試述基因克隆載體進(jìn)化過程

1個(gè)回答2023-07-09 05:56

答案的兩個(gè)要點(diǎn)其實(shí)就是我們做載體構(gòu)建兩個(gè)基本側(cè)略。平末端連接和粘性末端連接。第一種就是采用粘性末端連接的策略。通過在你的平末端目的片段兩端分別加上含EcoRI和Xhol的酶切位點(diǎn)的接頭序列，然后用這兩...

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為什么基拉要選擇拉克絲而不選擇芙蕾？

2個(gè)回答2022-12-23 16:39

很簡(jiǎn)單。動(dòng)畫里一個(gè)男主角的誕生必然有無數(shù)個(gè)女陪角的犧牲，芙蕾最初利用基拉。。單到最后發(fā)現(xiàn)其實(shí)自己是喜歡他的。。。。命運(yùn)的紅線一旦斷開就無法再次連起。。。而基拉也到后來知道自己所真正需要的

基因克隆不出來，為什么

1個(gè)回答2022-09-01 13:52

基因克隆是70年代發(fā)展起來的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù)，可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。最終目的在于通過相應(yīng)技術(shù)手段，將目的基因?qū)爰闹骷?xì)胞，在宿主細(xì)胞內(nèi)目的基因被大量的復(fù)制。

基因克隆的基本步驟有哪些

1個(gè)回答2022-12-05 19:36

　　選擇目的基因,并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物；　　用引物PCR擴(kuò)增目的基因片段；　　選擇合適（抗性標(biāo)記、酶切位點(diǎn)等）的克隆載體（為了保真擴(kuò)增）,并將PCR片段連接入克隆載體中；（一般用Taq酶的PCR產(chǎn)物在末...

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車載電源的選擇？

1個(gè)回答2025-01-03 18:32

1、選擇車載電源除了價(jià)格因素外，主要需要考慮的是車載電源對(duì)輸入電壓的要求和輸出功率的大小，此外由于各種用電器的功率差別很大，因此要根據(jù)使用需求選擇車載電源，原則是夠用為主。 2、根據(jù)使用的用電...

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你好，你克隆過未知的基因吧？我也要克隆一個(gè)未知基因。我有以下疑問：1，我克隆魚的一個(gè)未知基因。

1個(gè)回答2022-10-28 23:30

你這個(gè)應(yīng)該比較簡(jiǎn)單吧，80%的同源性設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物應(yīng)該成功率是比較高的，前提是你要做的這種魚中有這個(gè)基因。 5對(duì)夠不夠不好說，這東西的看運(yùn)氣，但是我覺的應(yīng)該夠了。拿全長(zhǎng)看怎么拿了，如果你PCR引物設(shè)...

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